色谱原理
色谱法是一种基于混合物中各组分在固定相和流动相之间分配平衡的分离技术。其基本原理可以概括为以下几点:
1. 分配原理 :
色谱法利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配能力不同,使混合物流经固定相时,各组分因分配系数不同而分离。
2. 涡流扩散 :
在填充色谱柱中,组分随流动相向柱出口迁移时,流动相受到固定相颗粒的阻碍,不断改变方向,形成类似涡流的流动,导致色谱峰变宽。
3. 分子扩散 :
组分分子在流动相中由于浓度梯度,会自发向前和向后扩散,造成谱带展宽。
4. 传质阻力 :
气相色谱中,试样组分从气相移动到固定相表面,存在气相传质阻力;液相色谱中,试样组分从固定相的气/液界面移动到液相内部,存在液相传质阻力。
5. 流动相线速度 :
流动相线速度对柱效有显著影响,存在一个最佳流速,使得柱效达到最高点。
6. 固定相粒度 :
固定相颗粒越细,柱效越高,且受线速度影响较小。
色谱法有多种类型,包括吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶色谱和亲和色谱等,它们根据不同的分离机制进行操作。
色谱法在分析化学、有机化学、生物化学等地方有着广泛的应用,如用于定性、定量分析化合物,分离药物成分等
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